高效液相色譜儀分析中,柱效是色譜柱中流動(dòng)相線性流速的函數(shù),使用不同的流速可得到不同的柱效。對(duì)于一根特定的色譜柱,要追求最優(yōu)柱效,最好使用最優(yōu)流速。
一、最優(yōu)流速的選擇:
1、內(nèi)徑4mm色譜柱,流速一般為0.8mL/min。
2、內(nèi)徑4.6mm色譜柱,流速一般為1mL/min。
3、內(nèi)徑10mm制備柱,流速一般為3mL/min。
當(dāng)選用最優(yōu)流速時(shí),分析時(shí)間可能會(huì)延長(zhǎng),可采用改變流動(dòng)相洗脫強(qiáng)度的方法以縮短分析時(shí)間。如使用反相柱時(shí),可適當(dāng)增加甲醇或乙腈的含量。
二、流動(dòng)相使用注意事項(xiàng):
使用合適的流動(dòng)相可延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命,提高柱性能。
1、含水流動(dòng)相最好在實(shí)驗(yàn)前配制,尤其是夏天使用緩沖溶液作為流動(dòng)相時(shí)放置不要超過(guò)12h。最好加入疊氮化鈉,防止細(xì)菌生長(zhǎng)。
2、流動(dòng)相要使用0.45μm濾膜過(guò)濾,除去微粒雜質(zhì)。
3、使用HPLC級(jí)溶劑配制流動(dòng)相。
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