高效液相色譜儀分析中進樣上柱的樣品必須是可重現的均質溶液,樣品前處理是為了盡可能除去對分析有干擾的雜質,保證重現性好,不損害色譜柱,能與HPLC色譜條件相兼容。
一、溶劑:
溶解樣品的溶劑應能溶于流動相而不影響樣品的保留值和分離度,最好使用流動相溶解樣品或使用比初始比例流動相洗脫能力更弱的溶劑溶解樣品。當樣品所用溶劑與流動相不一致時,應避免樣品進入柱中時因溶解度降低而導致沉淀。
未溶解的或含顆粒物的樣品溶液會造成堵塞,進樣前一定要使用合適的濾膜過濾。
二、進樣量:
在分析型色譜中,加到色譜柱上的樣品量一般是μg級,也可以更少。如果樣品溶液濃度過大,可通過稀釋降低溶液中被測物的濃度,以避免色譜柱超載或檢測器超限。進樣體積應盡量小,避免由于體積過載對分離造成不良影響。
為適應檢測靈敏度的需要,某些痕量分析需要將樣品濃縮和富集。
三、樣品純度:
可根據樣品性質和分離目的使用固相萃取和溶劑萃取等樣品前處理手段,最大程度的除去干擾物,達到純化和富集目標化合物的目的,同時延長色譜柱使用壽命。
組分非常復雜的樣品往往需要預分離為簡單的片段,避免色譜峰過分重疊。
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