影響高效毛細(xì)管電泳色譜儀遷移速率的因素有待分離分子的性質(zhì)、緩沖液pH值、緩沖液離子強(qiáng)度、電場強(qiáng)度、電滲和支持介質(zhì)的篩孔等。
一、待分離分子的性質(zhì):
待分離分子帶的電量越大,直徑越小,形狀越接近球形,遷移速率越大。
二、緩沖液pH值:
緩沖液pH值距離其等電點(diǎn)越遠(yuǎn),待分離分子所帶凈電量越大,遷移速率越大。但pH過高或過低會引起蛋白質(zhì)變性。
三、緩沖液離子強(qiáng)度:
緩沖液離子強(qiáng)度過低,則緩沖能力差,不易維持pH恒定。
緩沖液離子強(qiáng)度過高,在待分離分子周圍形成較強(qiáng)的帶相反電荷的離子擴(kuò)散層(離子氛),降低蛋白質(zhì)的帶電量,使遷移速率變小。
四、電場強(qiáng)度:
電場強(qiáng)度越高,顆粒的遷移速率越大。
五、電滲:
當(dāng)電滲方向與電泳方向一致時,加快顆粒的遷移速率。反之,當(dāng)兩者方向相反時,減慢顆粒的遷移速率。
六、支持介質(zhì)的篩孔:
支持介質(zhì)的篩孔越小,顆粒在移動的過程中受到的阻力越大,遷移速率越小。
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