高效液相色譜儀鍵合固定相是采用化學(xué)反應(yīng)將固定液鍵合在硅膠載體表面上所形成的填料,具有使用過程中不流失、化學(xué)性能穩(wěn)定和熱穩(wěn)定性好等特點(diǎn)。
一、制備硅膠基質(zhì)鍵合固定相的注意點(diǎn):
1、鍵合反應(yīng)前,將硅膠表面的硅氧烷全部水解為硅烷醇。
2、除去硅膠表面的吸附水,使表面完全呈自由硅醇基。
二、形成鍵合固定相應(yīng)具備的條件:
1、所用基質(zhì)材料應(yīng)有某種化學(xué)反應(yīng)活性。
2、有能與基質(zhì)表面發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的官能團(tuán)。
三、雙重分離機(jī)制:
由鍵合基團(tuán)的覆蓋率決定。
1、高覆蓋率:以分配為主。
2、低覆蓋率:以吸附為主。
四、鍵合固定相制備:
1、合成硅膠基質(zhì)。
2、鍵合配體(鍵合相)。
3、端基封口。
五、鍵合固定相類型:
1、非極性鍵合固定相:
常用ODS鍵合固定相,既有分配作用又有吸附作用。
用途非常廣泛,適于分離非極性和弱極性化合物。
2、中等極性鍵合固定相:
常用醚基鍵合固定相,可用于正相和反相色譜。
3、極性鍵合固定相:
常用氨基和氰基鍵合固定相,用于正相色譜。
氨基鍵合固定相是分離糖類最常用的固定相。
六、鍵合固定相特點(diǎn):
1、傳質(zhì)快:表面無深凹陷。
2、壽命長:化學(xué)鍵合,耐流動(dòng)相沖擊,穩(wěn)定。
3、選擇性好:可鍵合不同官能團(tuán),提高選擇性。
4、有利于梯度洗脫。
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