反相鍵合相液相色譜儀流動相溶劑極性越低,洗脫能力越強。
一、常用流動相:
1、甲醇-水。
2、乙腈-水。
3、四氫呋喃-水。
溶劑強度為水<甲醇<乙腈<四氫呋喃。
系統2較系統1好,原因如下:
系統2的粘度較系統1小,柱效好。粘度降低,柱壓降低,傳質阻力降低(溶質擴散阻力降低), 柱效升高。
乙腈的紫外末端吸收較甲醇小,在低波長處測定時,基線波動較甲醇小,測定誤差小。
二、流動相的選擇:
1、二元溶劑系統:
一般以洗脫能力最弱的水作為底劑,再加入一定量的可與水互溶的有機極性調節劑。常用的首選極性調節劑為甲醇和乙腈。
2、多元溶劑系統:
在二元溶劑系統中加入少量的四氫呋喃,常能改善某些難分離的物質對的分離度。
用水、甲醇、乙腈和四氫呋喃組成三元或四元溶劑系統,并進行優化,選出最佳溶劑系統。
三、溶質保留值隨溶劑極性變化的一般規律:
有機溶劑比例減小:
1、溶劑的極性增加,洗脫能力降低,溶質的保留時間增加。
2、不同溶質組分間的分離度增加。
3、溶質的柱效降低。
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